Informação necessária para a análise da amostra

Para assegurar uma receção e registos das amostras adequados e rápidos, é importante que:

  • As amostras enviadas estejam corretamente etiquetadas (por ex., iniciais/código de referência único do paciente, data de nascimento...).
  • Que juntamente com a amostra seja enviado:
    • O formulário de pedido de estudo devidamente preenchido;
    • A documentação adicional que contenha informação clínica relevante para a interpretação dos resultados, tanto do paciente como, idealmente, de membros da sua família;
    • O consentimento informado assinado pelo paciente.

Antes de analisar uma amostra deverá sempre verificar-se o rendimento da colheita de amostra de ADN através do controlo interno para a quantificação de ADN. Se a concentração de ADN for inferior aos parâmetros estabelecidos, será contactado e, se necessário, ser-lhe-á pedido que forneça uma nova amostra.

Requisitos relativos à amostra

O nosso laboratório realiza análises genéticas de diversas amostras biológicas, adaptando-se ao tipo de análise requerido. Para garantir a estabilidade e a qualidade da amostra, siga as recomendações e as boas práticas de conservação e de transporte que indicamos a seguir (considera-se como temperatura ambiente: 15 °C – 30 °C; refrigerada: 4 °C – 10 °C; congelada, será especificado se é -20 ou -80 °C). Isto permitirá obter resultados fiáveis e evitar análises falhadas ou a necessidade de repetições.

No caso das amostras pré-natais e de outras amostras urgentes, não hesite em entrar em contacto connosco através do endereço de correio eletrónico apoiocliente@healthincode.com para resolver qualquer questão ou para nos notificar do envio da amostra.

  • 5-15 ml de sangue periférico em tubos com EDTA
  • Certifique-se de que o sangue está corretamente homogeneizado com o anticoagulante.
  • Após a colheita, conserve a amostra à temperatura ambiente, se o envio se realizar nas primeiras 24 horas. Caso o envio se realize decorridas mais de 72 horas após a colheita da amostra, mantenha-a refrigerada.
  • Não conserve amostras refrigeradas por mais do que um mês.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte poderá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.

    • 4 ml de sangue periférico em tubos com EDTA.
    • Se o envio da amostra não for realizado imediatamente após a colheita, conservar a amostra a -20ºC.
    • O envio deve ser efetuado de uma das seguintes formas:
      • Gelo seco: a amostra deve ser colocada num saco de plástico, preferencialmente almofadado, ou numa caixa de envio, a fim de evitar quebras. Posteriormente, será introduzida no contentor com o gelo seco.
      • Contentor refrigerado2 (apenas de novembro a março):
        1. Congelar os acumuladores de frio a -20ºC, em posição horizontal, durante um mínimo de 12 horas antes do envio.
        2. Retirar o contentor de refrigeração do congelador e introduzir a amostra*, tal como se observa na imagem anexa. Para uma maior proteção do recipiente e para evitar possíveis contaminações em caso de quebra do tubo, recomenda-se a introdução do tubo de sangue num pequeno saco de plástico antes de o colocar no contentor.
          Instruções
        3. Introduzir o contentor de refrigeração dentro da sua embalagem protetora de poliestireno e colocar o elástico de fecho correspondente.
        4. Introduzir o contentor fechado num saco almofadado ou numa caixa de poliestireno.

        (2) Fornecido pela Health in Code; será necessário organizar o envio com vários dias de antecedência através do e-mail recolhas@healthincode.com

        (*) Devem ser utilizados tubos compatíveis: volume máximo 10mL, diâmetro máximo 16.5mm e comprimento total máximo 107mm. Recomenda-se o uso de tubos de 5 mL para facilitar a sua introdução no contentor.

  • 2,5 ml de sangue periférico utilizando tubos PAXgene (Caso não disponha de tubos PAXgene, pode solicitá-los através do endereço de correio eletrónico apoiocliente@healthincode.com).
  • Para a obtenção de sangue, siga as instruções do fabricante de tubos PAXgene.
  • 3-5 ml de sangue periférico em tubos com EDTA, que serão utilizados para confirmação dos resultados obtidos após a análise de ARN.
  • Após a colheita, conserve a amostra à temperatura ambiente, caso o envio tenha lugar nas primeiras 24 horas. Se o envio tiver lugar mais de 72 horas após a colheita da amostra, mantenha-a refrigerada.
  • Não conserve amostras refrigeradas por mais do que um mês.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • 100 ng de ADN genómico.
  • É importante que o ADN extraído tenha uma relação de absorbância (A260/280) compreendido no intervalo 1,7 – 2,1.
  • Se o envio não se realizar imediatamente após a colheita de amostra de ADN, armazene as amostras refrigeradas ou congeladas até ao seu envio.
    As boas práticas indicam que o ADN pode ser conservado refrigerado durante um ano e congelado (-20 °C ou -80 °C) infinitamente (por ex., amostras conservadas nas instalações de um biobanco).
  • É recomendável que envie a amostra nas mesmas condições de armazenamento. Se estiverem refrigeradas, envie-as com acumuladores de frio, e se estiverem congeladas, envie-as com gelo seco.
  • No caso de amostras que se encontrem à temperatura ambiente e se prevê que a temperatura durante o transporte poderá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • Para análise do genoma completo (WGS) por long reads (NGS de terceira geração):
    • ≥ 3 µg de ADN genómico
    • Durante o protocolo de colheita da amostra, desative as nucleases e proteínas de ligação ao ADN através de uma protease (por ex. proteinase K)
    • Proceda à colheita de ADNg no momento em que obtiver a amostra.
      Se tal não for possível, conserve a amostra a 4 °C por um período máximo de 48 horas. Para armazenamentos por períodos superiores a 48 horas, congele as amostras.
    • Envie o ADNg extraído em gelo seco.

Antes de analisar o DNA recebido, a Health in Code verificará sempre o rendimento da extração de DNA realizada pelo cliente, por meio do controle interno de quantificação de DNA. Se a concentração de DNA for inferior aos parâmetros estabelecidos, entraremos em contato e, se necessário, será solicitada uma nova amostra.

  • Utilizar um kit ORAGENE®- DNA (OCR-100 ou OG-600). Caso não disponha deste kit, pode pedi-lo através do endereço de correio eletrónico apoiocliente@healthincode.com.
  • A Health in Code não recomenda a recolha de amostra bucal a partir de esfregaço com zaragatoa.
  • Para a obtenção de sangue, siga as instruções do fabricante do kit ORAGENE.
  • Após a recolha, conserve e envie a amostra à temperatura ambiente.
  • Um cartão FTA (com 4 áreas de amostragem). Caso não disponha deste kit, pode solicitá-lo através do endereço de correio eletrónico apoiocliente@healthincode.com.
  • Para a obtenção da amostra, siga as instruções fornecidas juntamente com o material recebido.
  • Após a colheita, conserve e envie a amostra à temperatura ambiente.
  • Utilize um kit Genatal ou Genatal Plus. Pode solicitar o kit através da nossa página Web Genatal - Health in Code ou contactando-nos através do endereço de correio eletrónico apoiocliente@healthincode.com.
  • Para a obtenção de sangue, siga as instruções do fabricante do kit Genetal/Genetal Plus.
  • Após a colheita, conserve e envie a amostra à temperatura ambiente.
  • ≥ 10 ml num tubo cónico estéril.
  • 3-5 ml de sangue periférico num tubo com EDTA da gestante. Esta amostra será utilizada para a despistagem por contaminação materna. Caso o rastreio tenha sido realizado previamente em suas instalações, indique-o na solicitação do estudo.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte poderá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.

Importante: algumas amostras de líquido amniótico podem requerer uma cultura prévia à sua análise, conforme indicado na tabela seguinte:

Estudos que requerem externalização para cultura de células:

Tipo de estudo MLPA ARRAY Exoma Expansões Mutação pontual
(≤3 exões)		 Sequenciação Sanger
(>3 exões)
Líquido Amniótico Sim Sim Sim Sim No Sim

(Volume mínimo para cultura: 10 ml.)
A cultura das amostras de líquido amniótico será realizada por um laboratório externo.

  • ≥ 10 vilosidades limpas em tubo cónico estéril com um meio de transporte suplementado.
  • 3-5 ml de sangue periférico em tubos com EDTA da gestante. Esta amostra será utilizada para a despistagem por contaminação materna. Caso o rastreio tenha sido realizado previamente em suas instalações, indique-o na solicitação do estudo.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • ≥ 1 ml de sangue do cordão umbilical num tubo com EDTA.
  • Certifique-se de que o sangue está corretamente homogeneizado com o anticoagulante.
  • Após a colheita , conserve a amostra à temperatura ambiente, caso o envio tenha lugar nas primeiras 24 horas. Se o envio tiver lugar mais de 72 horas após a colheita da amostra, mantenha-a refrigerada.
  • Não conserve amostras refrigeradas por mais do que um mês.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • ≥ 20 mg em meio de transporte suplementado.
  • 3-5 ml de sangue periférico em tubos com EDTA da gestante. Esta amostra será utilizada para a despistagem por contaminação materna. Caso o rastreio tenha sido realizado previamente em suas instalações, indique-o na solicitação do estudo.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • 1 tubo flask com uma confluência entre 80 e 90%.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • Para este tipo de amostra, recomendam-se os seguintes tipos de preparados:
    • Biópsia de tecido em bloco de parafina.
    • 8-10 cortes do bloco de parafina com 10 μm de espessura.
    • Lamela com amostra fixada, 8-10 cortes com 10 μm de espessura. É necessário delimitar e marcar a zona tumoral da amostra através de tingimento com hematoxilina-eosina.
    • 10-20 mg de tecido obtido a partir de bloco de parafina.
  • No caso de enviar cortes do bloco de parafina ou tecido obtido a partir do bloco de parafina, forneça informações sobre a estimativa da celularidade da amostra tumoral tumoral (% de células tumorais em comparação com o total da amostra). Recomenda-se uma percentagem de celularidade tumoral de 30%, as percentagens inferiores podem comprometer a interpretação dos resultados.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • 20 mg de tecido tumoral em recipiente estéril, obtido diretamente a partir da peça cirúrgica ou a partir de várias colheitas de amostras procedentes de biópsia por aspiração com agulha fina.
  • Envie informações sobre a estimativa da celularidade da amostra tumoral (% de células tumorais em comparação com o total da amostra). Recomenda-se uma percentagem de celularidade tumoral de 50%, as percentagens inferiores podem comprometer a interpretação dos resultados.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • Para este tipo de amostra, recomendam-se os seguintes tipos de preparados:
    • Frasco de cultura com a linha celular correspondente em crescimento;
    • 10-20 mg do pellet obtido da cultura após centrifugação a baixa rpm.
    • 6-8 seções de cultura celular fixada com formol e parafinada, com 10 μm de espessura, em tubos Eppendorf.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • 2-3 ml em tubo com EDTA.
  • Certifique-se de que a amostra está corretamente homogeneizada com o anticoagulante.
  • Conserve as amostras à temperatura ambiente e envie-as nas primeiras 24 horas após a sua obtenção, mantendo essa mesma temperatura.
  • Se prevê que a temperatura durante o transporte poderá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • → 250 ng de ADN genómico
  • É importante que a amostra tenha uma relação de absorbância (A260/280) compreendida no intervalo 1,7 – 2,1 e um DIN →6 quando o ADN é extraído a partir de aspirado de médula óssea, tecido tumoral (fresco ou parafinado) ou 10⁶ células da cultura celular.
  • No caso de enviar ADN a partir de tecido tumoral, forneça informações sobre a estimativa da celularidade da amostra tumoral (% de células tumorais em comparação com o total da amostra). Recomenda-se uma percentagem de celularidade tumoral de 30% para tecidos parafinados e de 50% para tecidos frescos. Percentagens inferiores podem comprometer a interpretação dos resultados.
  • Se o envio não se realizar imediatamente após a colheita de amostra de ADN, armazene as amostras refrigeradas ou congeladas até ao seu envio. As boas práticas indicam que o ADN pode ser conservado refrigerado durante um ano e congelado (-20 °C ou -80 °C) infinitamente (por ex., amostras conservadas nas instalações de um biobanco).
  • É recomendável que envie a amostra nas mesmas condições de armazenamento. Se estiverem refrigeradas, envie-as com acumuladores de frio, e se estiverem congeladas, em gelo seco.
  • No caso das amostras à temperatura ambiente e se prevê que a temperatura durante o transporte irá ultrapassar os 35 °C, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.
  • Antes de analisar o ADN recebido, a Health in Code verificará sempre o rendimento da colheita de amostra de ADN realizada pelo cliente, através do controlo interno para quantificação de ADN. Se os parâmetros forem inferiores ao estabelecido, será contactado e, se necessário, ser-lhe-á solicitada uma nova amostra.

Biópsia líquida

  • 2 tubos Streck Cell-Free DNA Blood ou PAXGene cfDNA.
  • Se o envio não tiver lugar imediatamente após a colheita da amostra:
    • Tubos Streck Cell-Free DNA Blood: manter entre 6-37 °C até 14 dias.
    • PAXGene cfDNA: manter à temperatura ambiente até ao envio, conforme o tempo decorrido após a colheita da amostra: 3 dias até 37 °C, 7 dias até 30 °C e 14 dias até 25 °C.
  • É recomendável que envie a amostra nas mesmas condições de armazenamento. Se prevê que a temperatura durante o transporte poderá aumentar, recomenda-se a utilização de um acumulador de frio.

Biópsia líquida

  • 10-50 ng ADN tumoral circulante. Recomenda-se a colheita a partir do sangue, do líquido cefalorraquidiano ou do líquido pleural.
  • É necessário quantificar o ADN antes do envio. Recomenda-se a utilização do kit comercial de análises de fragmentos “Cell-free DNA” da Agilent Technologies. Para esse efeito, deve considerar-se o ADN detetado num intervalo de tamanhos entre 100 e 300 pb, que corresponde ao ADNct, rejeitando-se o ADNg extraído em simultâneo.
  • Armazene as amostras congeladas (-80 °C) até ao envio.
  • Envie as amostras em gelo seco, assegurando-se de que o contentor é adequado para manter a temperatura durante o transporte.

Condições da embalagem para transporte

O sistema de embalagem deve prevenir roturas ou danos, utilizando bolsa tripla, em conformidade com o Acordo ADR, instrução P650 e/ou instrução 650 IATA.

No caso das amostras recolhidas através de um kit, é recomendável a utilização da mesma caixa do fabricante do kit ou da caixa disponibilizada pela Health in Code para a sua devolução.

Se utilizar acumuladores de frio ou gelo seco, este deve ser colocado entre a embalagem secundária e a terciária, NUNCA deve ir no interior da embalagem secundária. Este mesmo critério é aplicável aos documentos que acompanham as amostras.

Na embalagem exterior, quer seja disponibilizada pela Transportadora quer não, e independentemente do meio de transporte, deve incluir-se num lugar visível:

  • Os dados de contacto do remetente: nome, endereço e número de telefone de uma pessoa responsável e informada acerca do envio.
  • Os dados de contacto da Health in Code: Calle Travessia, 15E – Edificio Biohub, Marina de Valencia, 46024, Valência. Espanha.
  • a etiqueta adesiva UN 3373 ou a frase “Exempt Human Specimen”.
  • Os requisitos de temperatura durante o transporte (recomendável).

Envios/recolha de amostras

Pode enviar as amostras diretamente ou através do nosso serviço de recolhas.

Para coordenar uma recolha, deve solicitá-la, tanto em Espanha como nos outros países, com pelo menos duas horas de antecedência:

  • Por telefone, através do número 963 212 340. Selecionando a opção número 2.
  • Por correio eletrónico, escrevendo para recolhas@healthincode.com, indicando-nos o local, a data e a hora da recolha.
    • De segunda a quinta-feira: entre as 08:00-13:45 e as 15:30-17:00
    • à sexta-feira e nos meses de julho e agosto: entre as 08:00-13:45

Para esclarecer qualquer dúvida, os nossos horários de atendimento ao cliente são:

  • Segunda a quinta-feira das 8:00 às 17:00
  • Sexta-feira das 8:00 às 15:00
  • Julho e agosto das 8:00 às 15:00